植酸酶酶活测定（植酸酶）

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1、植酸酶是一类特殊的磷酸单酯酶，能够将植酸和植酸盐中的磷酸基团逐一水解，最终释放肌醇和无机磷。

2、植酸酶是一个广义概念，所有能够水解植酸产生无机磷的酶都可以称为植酸酶（Lei et al.，2007）。

3、由于对植酸酶的分类标准还不统一，目前国内外对植酸酶的分类比较混乱。

4、主要有四种分类方法（丁强等，2010；李晓龙等，2010）：（1）基于植酸酶的来源，可将植酸酶分为细菌植酸酶、真菌植酸酶和植物植酸酶。

5、（2）基于植酸酶的最适pH，可分为酸性植酸酶和碱性植酸酶。

6、（3）基于植酸酶水解底物植酸的立体专一性，可分为3-植酸酶（myo-inositol hexak isphosphate 3-phosphorylase，EC3.1.3.8）、6-植酸酶（myo-inosito l hexakisphosphate 6-phos-phorylase，EC3.1.3.26）和5-植酸酶（myo-inositolhexak isphosphate 5-phosphorylase，EC 3.1.3.72），这种分类方法是从底物出发，由国际纯粹应用化学联合会-国际生物化学与分子生物学联合会（IUPAC-IUBMB）确定的。

7、但是利用该方法来确定植酸酶的分类比较复杂，因为对每一个植酸酶的分类都需要通过色谱法对产物进行分析。

8、（4）从植酸酶本身的序列和结构出发，基于三维结构和催化机制，将植酸酶分为组氨酸酸性磷酸酶（histidine acid phosphatase，HAP）、beta-折叠桶磷酸酶（β-propellar phytase，βPP）、半胱氨酸磷酸酶（cysteine phosphatase，CP）和紫色酸性磷酸酶（purple acid phosphatase，PAP）等（Lei et al.，2003）。

9、这种分类方法比较简单，被绝大多数植酸酶研究者所采纳。

10、植酸酶的分子质量因来源不同差异很大，一般为30～250kDa，包括一个大分子和一个小肽片断。

11、植酸酶是一种特殊的酸性磷酸酶，适合pH为4～6，只有Enterobacter sp.中产生的植酸酶的最适pH在7.0～7.5，而来自植物的植酸酶的最适pH一般为5.0～7.0。

12、总体来说，来自细菌的植酸酶的最适pH接近中性，而来自真菌的植酸酶最适pH一般为2.5～6.0，这种差异是由不同来源的植酸酶在分子构造上的不同造成的。

13、植酸酶对温度的适应性要求较高，一般适宜温度为46～57℃，当超过60℃时，植酸酶的活性会部分损失，当温度达到70℃时，则酶活性大部分丧失。

14、而经制粒镶嵌成型的植酸酶，最高耐温达85℃。

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